冷胁迫是危害农大田作物总产量的基本场景考验之三。钙依靠性血清激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）移动信号传达着到上皮细胞并激活开通对逆境中成长相应的重要调高指数公式，但其干预体制尚不清析。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷硝化作用突显位点检测工具服务。

用英语主题词：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文版题目：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

加盟商标准：浙江大学

研究探讨物料：番茄

拜谱带来了高技术：磷硝化作用掩盖位点监测

研究方案指导思想：

一、研究方案最终结果

1、CPK27在低温环境胁迫下表示调涨，所以增强学习植物体抗冻性

继往实验表述，CPK27在冷胁迫生活条件下形容上浮。为印证某些后果，本段中我们选用CPK27的三个敲除突变性系（cpk27 #2，#6）开始耐冷性公测，察觉CPK27的转录横向重要如果超过對照组（图1a-b）。在CPK27形容被治理和改善的作物中，对耐冷性的激发影响重要降低。进十步的亚内部品牌定位与激发实验表述，冷胁迫推进CPK27向内部核积累作文，并激发其磷碱化横向（图1 f）。免疫性痕迹具体分析进十步验证冷胁迫促进 CPK27 在核内蛋白酶丰度曾加、胞内丰度才能减少，外源CaCl₂整理可位置修复cpk27的冷太敏感表型，表述CPK27依赖于Ca²⁺表现充分调动影响。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖关系习惯强化番茄耐冷性

2、CPK27实现干预黄胺类获得渠道排解恒温受伤

转录组测序毕竟呈现，CPK27的过形容方式有效调涨黄胺类海洋生物转化成有关于人类表观遗传，如CHS、CHI和FLS等，同时黄胺类细胞代谢环路有效丰度。而CPK27突变率体中等等人类表观遗传形容方式调低，警告CPK27能够 推进黄胺类转化成幫助茎秆可以高湿胁迫给我们的空气氧化各种压力（图2a-e）。

图2 RNA-seq概述CPK27调整的冷死机dna

3、HY5是CPK27介导的抗寒移动信号通道中的关键性靶标

为验证能够 CPK27 与 HY5 的相护影响，小说拜谱生物关键在于确定了发酵粉双混种杂交（Y2H）试验英文英文，結果印证这这两者存有着相护影响（图3a）。双原子核荧光主动间依存（BiFC）试验英文英文进一大步证实CPK27 与 HY5 在癌细胞质内形成相护影响（图 3b）。继而能够免疫力共发展等技术应用，察觉HY5与CPK27在作物身体里存有着相护影响，且这这两者的相护影响具备有钙化合物（Ca²⁺）依赖性（图 3c）。因此，在Co-IP试验英文英文的球蛋白获取前施用冷胁迫补救，結果现示冷胁迫可增強HY5与CPK27的相护影响（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷过酸其主要位点

4、CPK27磷硝化作用HY5增进其转录活力性，驱动黄大环内酯DNA抒发

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷碱化装饰位点查测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷酸性反应HY5并减弱其稳定义性

5、CPK27 在类黄酮生物学合出信号通路中用于HY5的品牌进入校园市场

宗合DNA描述和消化吸收物探讨但是（图5），CPK27在冷胁迫反应的过程中用于HY5的中上游，利用改善 HY5 介导的类黄酮生物学分解成信号通路影响到草本花卉耐旱性。

图5 CPK27用处于HY5品牌进入校园市场

二、本文总结ppt

综合上面的根据上述，文中调查方案显示CPK27磷碱化遮盖HY5血清，刺激启动类黄酮生成方法，使得抗空气氧化类物质积少成多，以致怎强耐寒性能力素质。该调查方案系统阐述了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联改善规则（图6），证明CPK27介导的HY5磷碱化是拼接钙数据信息与次生消化吸收攻击力的最为关键的过程，为谅解常绿植物逆境中成长出错网供应了新上帝视角。

图6 CPK27-HY5模块图片提升 绿色植物耐受力冷胁迫的缘由

三、拜谱总结ppt

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清酶质组学、修饰语血清酶质组学、细胞代谢组学、转录组学等几组学产品的技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参考选取论文：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134