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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
碳水子主观能动性的繁复性和很多的N-glycoproteins低表达工艺层次令对N-glycosylation构成特征的研究工艺的描写特别困苦。在在线检测低丰度的N糖基化遮盖蛋清或肽段时,其中的掺入广泛未遮盖的蛋清肽断,这很最易将低丰度的糖基化遮盖蛋清肽段的数字信号改变。凝素亲和法是迄今为止糖蛋清质组学中选用最广泛泛的分离处理含有工艺。凝集素(lectin)有的是类糖紧密运用蛋清质,能缜密判别某个个性化构成特征的单糖或聚糖中指定的糖基编码序列而与之紧密运用,想一想与糖链可逆性非共价紧密运用,糖蛋清或糖肽被凝集素驯服时候,经常用指定的单糖经过市场竞争紧密运用凝集素将糖蛋清或糖肽洗刷下。 淀粉酶质含量质经过了酶解后通过凝集素(lectin)聚集N-糖基化肽段,并且用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中切掉接在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该治理 导致Asn团伙量延长2.9890Da。结果用高高精准度LC-MS质谱仪探测脱糖后的肽段,顺利通过文献检索数据资料库,核实脱糖后团伙量与此基本机理团伙量的变现各种糖基化体现肽段的回文序列,关键在于肯定该淀粉酶质含量质的N-糖基化位点。N-糖基化位点肯定过后,再通过label-free的机理对其通过参考值进行分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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