肉的宰后嫩化最主要的归因于肌原玻纤组成的破环，肌原玻纤组成是由内源性球血清油脂淀粉水解酶化学吸附肌原玻纤和人体肿瘤内部系骨架球血清致使的。与一百多年来总是是了解亮点的钙球血清酶各不相同，胱天球血清酶（caspases）近为感业余爱好来说题。胱天球血清酶在人体肿瘤内部系凋亡的施行时段起着至关极为重要的影响，各举caspase-3在死去球血清油脂淀粉水解中的影响是各个面和繁复的，由于最该进三步学习。S-亚硝基化根据设定钙挥发释放、力量代谢率、球血清质化学吸附和人体肿瘤内部系凋亡来设定色泽，其中包括嫩度和持水水平。后期学习发掘S-亚硝基化就可以下跌依懒线粒体的caspase-3级联反响，这有可能是背部肌肉人体肿瘤内部系凋亡和羊肉品格變化的的原因。caspase-3的学习关键点是其与人体肿瘤内部系凋亡的问题，殊不知，较少有学习研究综述S-亚硝基化设定caspase-3的考核机制。

2024年9月由成都林业读书张万刚传授团对在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物体为该研究提供了亚硝基化修饰语组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文版主题词：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202四年会影响指数：5.7

刊出時间：2024年9月

加盟商公司的：南京农业大学

研究方案食材：蛋白

拜谱带来技木：亚硝基化修饰组学

技艺交通路线：

一、论述可是

01.Caspase-3化学活化

现今尚不看清楚NO对caspase-3的缓和功效可否归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样盐浓度等度的GSNO看做外源性NO现货供应，以分析caspase-3的体内S-亚硝基化。后果表示，与没得GSNO的组比较，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力性重要调低（图1），与之前简讯统一。GSNO加工调低caspase-3活力性的自身缘故仍仍待展现。

图1 有所差异酸度的GSNO治理对caspase-3特异性的影晌

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化度

论述Caspase-3的亚硝基化情况，以是因为GSNO对Caspase-3的作用性。经GSNO处里后，检查测量到caspase-3蛋清S-亚硝基化屈服强度上升（图2）。许多最终结果是因为，外源性GSNO培养出来可成功创业帮助caspase-3的离体S-亚硝基化。从未有过惊喜的是，在不会存在GSNO会存在的照表组中检查测量到有一个暗淡的S-亚硝基化带，这是因为caspase-3会出现内源性的S-亚硝基化。不但，本论述中caspase-3的S-亚硝基化情况较高，而caspase-3的灵活性降低了，这与以往的论述完全一致。但，caspase-3的特异形S-亚硝基化遮盖位点尚不清晰，还必须 进一点的经历。

图2 GSNO办理对caspase-3S-亚硝基化横向的损害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的回文队列。颜色记号符号的回文队列觉得S-亚硝基化肽，橙红色记号符号的C觉得S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3生物降解结球蛋白

结球蛋清身为那种最核心的肿瘤血细胞骨架球蛋清，在长期保持肌肿瘤血细胞架构的的架构的删改性和收宿性方向起着最核心的功效，科学研究S-亚硝基化caspase-3对结球蛋清化学降解塑料的神经敏理智都包括最核心效果。与Std（未用胱天球蛋清酶-3和GSNO孵育的起始肌黏胶黏胶纤维球蛋清）组相对，0 μM GSNO组（肌原黏胶黏胶纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的删改结球蛋清含磷量显著性减少，温馨提示caspase-3对结球蛋清都包括不确定性的球蛋清淀粉酶质质水解力。在GSNO孵育后，删改结球蛋清的含磷量特别增强（P < 0.05）。显然，当GSNO渗透压上升时，删改结球蛋清的含磷量定期调整（P < 0.05）（图5）。一种出现认为，SNO装饰的caspase-3以层次依靠的的方式仰制结球蛋清的化学降解塑料。

图5.S-亚硝基化caspase-3光降解结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙蛋白酶-T

肌钙球血清质质-T (TnT)是原肌球球血清质质调结责任健身肌肉缩小的细细的的必要肌原植物棉纤维棉球血清质质。TnT的分解基本特征是加测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化要求下，caspase-3对TnT的分解现状如6如下，与Std组（因为不能含caspase-3和GSNO的肌原植物棉纤维棉）对比，caspase-3组中30 kDa TnT段落可观上升，表示caspase-3参与的了TnT的分解，除此之外，caspase-3与GSNO的孵育诱发30 kDa TnT急剧下降。在100和200 μM GSNO组间不能加测到清晰的性别差异(P > 0.05)，而当GSNO的浓度值提高400 μM 时，该段落可观少(P < 0.05)。这么多察觉表示了SNO绘制的caspase-3对TnT分解的抑制性效果。结球血清质质和TnT是caspase-3的的敏感底物，而GSNO治疗消减caspase-3的催化渗透性或者诱发肌原植物棉纤维棉球血清质质分解数量消减。综合上面的提出的，NO诱骗的S-亚硝基化都可以在绘制半胱氨酸残基来调结caspase-3的催化渗透性，因而进这一步危害其对结球血清质质和TnT的球血清质质水解反应能力素质，因而危害牛羊肉产品质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3溶解肌钙球蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结ppt

本深入分析重要途径初探S-亚硝基化对caspase-3遮盖的作用下列关于然后对鸡肉片肌原弹性钎维体内降解塑料的作用。核蛋白酶酶S-亚硝基化可遮盖caspase-3的半胱氨酸残基，导至导至caspase-3特异性大大减少，进一点治理和改善了其对鸡肉片肌原弹性钎维核蛋白酶酶的核蛋白酶酶电离力量。

三、拜谱总结ppt

的科学研究用于了酶活校正，亚硝基化淡化组学介绍，WB等检验技术手段，发掘核淀粉酶S-亚硝基化就能够淡化caspase-3的半胱氨酸残基，这形成了caspase-3催化活性的减小，相结每一步抑制性了其对牛肉片肌原棉纤维核淀粉酶的核淀粉酶电离作用。本的科学研究为描述核淀粉酶质亚硝基化对吃起来的调节作用管理机制提供了好几个个新的第一人称。

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规范论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663